细胞或组织样品要求
信息来源:本站原创   更新时间:2008/8/30 11:49:16

1.确保每组样品的细胞数量在5X107 以上。


2.细胞清洗和收集:将细胞培养至所需数量后,弃去培养基,加入不含离子的清洗缓冲液(250mM 山梨醇,20mM Tris-HCl pH 7.4)对细胞进行三次以上的漂洗以去除培养基的残留组分(对于贴壁培养的细胞,可在倒掉培养基后将清洗Buffer直接加入培养瓶中轻柔摇动后弃去上清;对于悬浮培养的细胞,可温和离心后弃去培养基,再加入清洗缓冲液重悬细胞),悬浮培养的细胞可直接弃去清洗液后保存,贴壁培养的细胞建议清洗后用机械方法将细胞刮下,加少量清洗液以便收集;


3.细胞保存和运送:将充分清洗过的细胞温和离心收集,尽量去除残留的上清(如有条件,可使用冻干设备),迅速置于液氮中保存(注意:需使用细胞冻存管,不可用普通Ep管);运送样品时,最好将样品置于便携式液氮罐中,如无此条件,也可将样品置于干冰中,避免冻融;短途运输的样品在未冷冻的情况下可以使用水冰或冰袋运输。


4.取纯净的目的组织,切成小块,总量大于0.3g,在250mM 山梨醇,20mM Tris,pH7.4的缓冲液清洗组织,确保无血或者其他组织的污染。液氮冻存或者-80℃保存,使用干冰运输;未冰冻的样品短途运输时可使用水冰或冰袋。


5.需要提供的数据:样品的数量,收集方法,保存和运送方法,制备时使用的试剂。


6.如果样品有毒性或有致病危险,请事先声明。


7.外地用户的样品请电话协商。