蛋白表达纯化
l 表达载体构建(原核,真核,昆虫细胞表达系统)
l SDS-PAGE
l 蛋白表达
l 蛋白纯化
工作流程(以原核表达为例):
A.原核表达载体构建(3周):为客户构建特定的载体,将目的基因插入到原核表达载体上。客户提供模板
B.原核蛋白表达小试 (3-4周) 1.选择1~2种表达菌株;2.筛选阳性克隆;3.表达优化和可溶性分析;4.SDS-PAGE检测表达。
C.蛋白纯化(3-4周)1.选择最佳表达菌株进行蛋白表达;2.培养1L大肠杆菌;3.亲和层析法纯化融合蛋白