蛋白表达及纯化
信息来源:本站原创   更新时间:2011/6/3 10:35:44

 

蛋白表达纯化

 

l         表达载体构建(原核,真核,昆虫细胞表达系统)

 

l         SDS-PAGE

 

l         蛋白表达

 

l         蛋白纯化

 

 

工作流程(以原核表达为例):

 

A.原核表达载体构建(3周):为客户构建特定的载体,将目的基因插入到原核表达载体上。客户提供模板

 

B.原核蛋白表达小试 (3-4周)  
1.选择1~2种表达菌株;
2.筛选阳性克隆;
3.表达优化和可溶性分析;
4.SDS-PAGE检测表达。

 

C.蛋白纯化(3-4周)
1.选择最佳表达菌株进行蛋白表达;
2.培养1L大肠杆菌;
3.亲和层析法纯化融合蛋白