蛋白质组lable-free
信息来源:本站原创   更新时间:2018/1/15 15:47:39
                                                             lable-free案例

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一、样品处理
1、8个样品冻干,加入TFA水溶液从溶。
2取8个C18脱盐柱分别加入100%乙jing离心。再加入TFA 离心。
38个C18脱盐柱分别加入从溶的样品,离心1min反复上样3次。
4分别加入洗脱液离心1min,并收集离心后的洗脱液冻干。
5将冻干后样品加入A液从溶后离心2min,取上清定量。
6分别取相同的量进行质谱检测

二、肽图质谱检测
检测条件
液相:EASY-nLC1200
色谱条件色谱柱:Dionex C18 PePMap300, 1.9um, 120Å; ID 150um, length 12cm
流速:略
洗脱条件:
time 0 8 24 60 79 80         85         86        90
%B 5 5 13 28 40 95         95         6           6


质谱仪:QE
质谱条件:数据采集时间:78min, 喷雾电压 (spray voltage)2.0KV; 毛细管温度(caplillary temperature):320; 碰撞能量(normalized collision energy):27%, 采集质量范围:300-1400 Da
CK_TIC
          

CK__BPC
            

单个样品重复3次

比较组间有统计意义的差异蛋白。